pcr引物扩增出来的长度和实际产物长度不一样,但相差很少,怀疑是引物本身可能有发夹结构,有这个可能么?这样的结果可信么?谢谢!请看一下我的附图，第三条marker是300bp

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/05/08 14:21:03

pcr引物扩增出来的长度和实际产物长度不一样,但相差很少,怀疑是引物本身可能有发夹结构,有这个可能么?这样的结果可信么?谢谢!请看一下我的附图，第三条marker是300bp
pcr引物扩增出来的长度和实际产物长度不一样,但相差很少,怀疑是引物本身可能有发夹结构,有这个可能么?
这样的结果可信么?谢谢!

请看一下我的附图，第三条marker是300bp

pcr引物扩增出来的长度和实际产物长度不一样,但相差很少,怀疑是引物本身可能有发夹结构,有这个可能么?这样的结果可信么?谢谢!请看一下我的附图，第三条marker是300bp
楼主这个相差很少是什么概念?100bp?10bp?如何分辨的?
引物的发卡结构不会太多的影响PCR产物的长度,发卡结构可能影响扩增效率.一般没影响.除非你的引物非常长,楼主的引物有多长?
实在不行就去测个序.
希望楼主多提供些信息.
请问楼主是用什么方法分辨出20bp的差异的?琼脂糖吗?
还是建议直接去测序,
或者如果你有标准品,把标准品和你PCR出来的产物混合在一起跑胶（浓度低一点总共100-200ng就好）,胶的浓度高一点,1.5%或者2.0%,120伏,多跑一会看会不会有两条带.
这样方便点.
这个不一定准的,这么小的误差是不能用marker说明的...要么你看我上面的方法,有标准品的话可以试试,在我们实验室,一般认为这个是误差范围内可接受的.因为MARKER也不是非常准,也受到胶,缓冲液的环境的影响.
还有,你用的是多少的MARKER?50bp ladder?还是100bp ladder?
有酶切位点吗两端?直接连进质粒测序吧.看不到图也没法说.不过首先你还是再跑一遍吧我觉得.

实际上，如果你用过一些引物设计的软件，有时候你会发现，软件设计出来的引物没有影响长度可以不一样主要是退火温度不能差太多引物长度一般是16

一般说,PCR 扩增产物片段长度包不包括引物在内?荧光定量PCR扩增长度一般为80到150 ,我想知道包不包括引物的长度? pcr引物扩增出来的长度和实际产物长度不一样,但相差很少,怀疑是引物本身可能有发夹结构,有这个可能么?这样的结果可信么?谢谢!请看一下我的附图，第三条marker是300bp 设计引物时,扩增产物的长度是如何知道荧光定量PCR的扩增产物长度为什么不能太长? 组织提取的cDNA和细胞提取的cDNA用同一引物PCR扩增出来的条带长度不一样,是什么原因?有什么方法改进吗我PCR产物大小141bp,纯化后,连接到pGEM-T载体克隆,使用M13通用引物,扩增片段长度是多少?我想知道假如用pGEM-T通用引物M13F 5'TGTAAAACGACGGCCAGT3'和M13 RV 5'CAGGAAACAGCTATGACC3'引物进行菌液PCR,扩增出的片段 PCR的扩增产物是什么是如何扩增出来的关于PCR引物问题请问为什么PCR后扩增的片段都是相同的长度?引物的延伸到的什么时候会停止呢? 半定量RT-PCR设计引物时产物长度为多少合适我说的是产物长度的限制哦 PCR中出现两倍产物大小的条带,怎么回事!经常PCR中会出现两倍目的片段长度的条带,引物特异性也还不错,扩增的模板也是40000bp左右的片段,有时候出现有时候又没了,我想问这类条带是怎样出来 pcr中两条引物在两条链上吗?如果是,怎么控制产物的长度,谢谢! PCR产物为什么会出现100~200bp的条带我用菌落PCR检测library质粒扩增质量,引物用的是takara的M13正反引物,目的质粒基因长度为~500bp.PCR完后电泳图谱显示~750bp有较明显条带,很奇怪的就是100~200bp有 PCR产物测序问题.我用简并引物扩增未知基因.设计了几对引物.都出现了目的条带.发现其中两对引物的产物长度比较长.因为我最终是要拿到这个未知基因的全长.我想选择最长的目的条带去测 PCR引物设计问题如果我设计的引物,扩增出来的目的片段长度为200BP,但是石蜡包埋组织提取出来的DNA模板大多数在100-120BP长度,那该如何.模板比理论上要扩出来的目的片段长度还短,怎么解决 PCR扩增不出来条带的原因? PCR扩增的产物中是不是也含有引物设计中的序列啊 PCR的扩增基因的引物是什么设计引物的时候,PCR产物跟EST序列长度是一样的吗?还是有别的特殊要求啊!