这是一道考研题：现需要得到某个基因的蛋白表达产物,用来制备该基因的多克隆抗体,请写出具体的实验方案具体的实验方案应包括：从材料准备到基因克隆、蛋白质的获取.

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/05/05 11:40:13

这是一道考研题：现需要得到某个基因的蛋白表达产物,用来制备该基因的多克隆抗体,请写出具体的实验方案具体的实验方案应包括：从材料准备到基因克隆、蛋白质的获取.
这是一道考研题：现需要得到某个基因的蛋白表达产物,用来制备该基因的多克隆抗体,请写出具体的实验方案
具体的实验方案应包括：从材料准备到基因克隆、蛋白质的获取.

这是一道考研题：现需要得到某个基因的蛋白表达产物,用来制备该基因的多克隆抗体,请写出具体的实验方案具体的实验方案应包括：从材料准备到基因克隆、蛋白质的获取.
下面是通过原核表达系统得到基因表达的产物以及制备多克隆抗体的一种方法：
1.得到目的基因：设计引物（引物上带有酶切位点）→进行PCR,胶回收,酶切,再胶回收,得到带有粘性末端的目的基因→将目的片段连接到具有相同粘性末端的PET载体上
2．得到目的蛋白：将连接好的带有目的片段的载体转入到DH5α菌系中,将菌涂布与相应的抗性LB培养过夜→挑菌→接到相应抗性的液态LB中,摇菌过夜→提取质粒,进行PCR鉴定与酶切鉴定确定转入的不是空质粒→送测→将的到地带有目的蛋白基因的质粒转入到BL21（DE3）菌系中→诱导表达蛋白→进行SDS-PAGE检测是否表达出正确大小目的蛋白→大量诱导→得到表达蛋白的DE3
3.纯化目的蛋白：将菌进行超声破碎→引用Ni-His结合树脂4℃结合过夜→应用不同洗液洗脱得到纯化的目的蛋白→应用BSA对蛋白含量进行定量
4.应用得到的纯化目的蛋白150mg目的蛋白+弗氏完全佐剂对兔子进行一免,以后每次应用150mg目的蛋白+弗氏不完全佐剂加强免疫2-3次（两周加强一次）→最后一次免疫10天后采血→这样就制备得到兔高免血清
5.纯化抗体（可做可不做）：应用抗体纯化试剂盒对得到的血清进行纯化,得到纯化的兔免目的蛋白的多克隆抗体

这是一道考研题：现需要得到某个基因的蛋白表达产物,用来制备该基因的多克隆抗体,请写出具体的实验方案具体的实验方案应包括：从材料准备到基因克隆、蛋白质的获取. 如何判断靶某种基因或蛋白是某个miRNA的靶标 BLAST 蛋白比对求助请问测序结果和已公开序列的基因蛋白比对为99%,能否确定其为新基因还是未公开序列的基因中的某个?还需要做什么? 考研的一道题这是一道数学分析考研原题, 如何得到已知蛋白序列的对应的基因序列已知基因如何得到其编码的蛋白获取Bt蛋白基因的方法是下列属于抗病毒基因的是病毒外壳蛋白基因淀粉酶抑制基因几丁质基因 Bt毒蛋白基因如果每个基因的表达依赖于一组基因调控蛋白,那么这些基因调控蛋白的表达也依赖于另一组基因调控蛋白的表达.如此下去,细胞将需要无限多个基因,大多数将编码基因调控蛋白.细胞是如何生物一道判断题协助扩散和主动运输是需要细胞膜上的同一种载体蛋白吗? 科学家通过基因工程的方法,能使马铃薯块茎含有人奶蛋白得到目的基因需要DNa连接酶哪错了考研数学线性代数的一道题例题3.33 照片里划线打问好的地方是根据什么定理得到的线粒体中核基因编码的蛋白如何转运至线粒体基质?别开玩笑了...这是考试题....写上去会死的..而且说的是核基因编码的蛋白是蛋白.. 携带有遗传信息的结构蛋白是基因吗? 假如你有某种真核生物的某个未知蛋白的部分纯品.怎样设计实验获得其基因并表达该蛋白 Bt毒蛋白基因对人体有什么作用1.会不会在人体内表达,为什么?2.进入人体内的是Bt毒蛋白还是Bt毒蛋白基因?这是探究性题目,要答为什么. 分裂是染色体整体的,复制是染色体某个基因片段的.怎么理解这句话?