作业帮pcr结果一半出来一般出不来是为什么?前几天跑了三次pcr,结果电泳除了marker什么都没有,昨天跑6个样加阴性阳性,可是前4个样品出来,后2个样品和阴性阳性什么都没有,就好像没有放入pcr仪器一
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/29 18:54:23
pcr结果一半出来一般出不来是为什么?前几天跑了三次pcr,结果电泳除了marker什么都没有,昨天跑6个样加阴性阳性,可是前4个样品出来,后2个样品和阴性阳性什么都没有,就好像没有放入pcr仪器一
pcr结果一半出来一般出不来是为什么?
前几天跑了三次pcr,结果电泳除了marker什么都没有,昨天跑6个样加阴性阳性,可是前4个样品出来,后2个样品和阴性阳性什么都没有,就好像没有放入pcr仪器一样,
体系都是一样的，10ul体系，配好再分装的，期间我也有只用阴性阳性跑过，结果还是比较正常，别人也都能跑，配体系的材料是一样的，配方也一样。但是一要用pcr检测的时候，就会出现这种不知道是什么的情况
pcr结果一半出来一般出不来是为什么?前几天跑了三次pcr,结果电泳除了marker什么都没有,昨天跑6个样加阴性阳性,可是前4个样品出来,后2个样品和阴性阳性什么都没有,就好像没有放入pcr仪器一
我个人认为,你这个体系太小了.虽然有热盖,但还是会蒸发.只不过蒸气跑不出去.
建议最小是20ul(现在试剂便宜,没必要省那么点钱).再加上机器孔间误差.你自己的加样误差.这样每个孔其实条件并不一样.
而且看你的实验,模板应该是后加是吧,这样的模板量,加得准吗?混匀了吗?
是不是机器的故 我以前放得分散啦也遇到一次
引物太烂 有时候能出来有时候出不来 你是要扩增还是菌P啊 扩增的话这个体系太小了是扩增，主要是为了检测转化结果那不就应该转化完涂板然后挑菌做菌P么 10ul倒是够了 没有就是没连进去呗我们是拟南芥转化完筛选过后检测拟南芥的dna……好吧 那就是没有转进去~不是转没转进去的问题，甚至不是模板的问题。因为一样的模板跑出来过，何况还有阳性对照也没有跑出来。你这做的是生物 不是数学 有时候有有时候没有都是...
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引物太烂 有时候能出来有时候出不来 你是要扩增还是菌P啊 扩增的话这个体系太小了
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机器故障吧
10ul体系还好了，我每次也是10ul跑，是不是后两个样品有问题呢。
以前没跑出来应该是PCR出了问题，比如设置之类的，我遇到过一次，我把预变性加到循环里去了。后 两个样品应该是实验操作了，或者你可以就母的片段电泳看有没得条带，再PCR