这个碱性磷酸酶底物显色试剂盒(BCIP/NBT)哪个厂家的好?

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/04 07:57:49
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操作方法：
1、按常 规操作 ,将蛋 白样品 进行 SDS-PAGE电泳,转膜（硝酸 纤维素膜 和 PVDF 膜 均
可使用）.封闭 30~120 min,一抗孵育 1 小时或过 夜；漂洗 5 次,碱 性磷酸酶标 记二抗孵 育 30~120 min,漂洗 5 次.如 上述步骤 采用磷酸缓 冲液,需 换用 Tris 缓 冲液漂洗 5 次以完全去除磷酸成分对于 AP抑制作用.
2、取 1ml AP reaction Buffer 中 加 10μl NBT溶液和 10μl BCIP 溶液,混匀.注意：根据膜的大 小,AP Buffer、NBT、AP Buffer NBTBCIP 的量等比例扩大.
3、把经 洗涤的 PVDF/NC 膜浸入显 色底物 混合物中,于室温平缓摇动进行温育.
⒋细心观察反 待蛋白膜上 条带呈色明显,而无明显背景时(一般约 5-15 分钟),把膜浸入水中漂洗停止反应.
注意：若信号太弱可增加反应时间.
5、拍摄膜照片 或直接保 存膜留作永 久试验纪录.

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